IMAGE J
灰度分析
DNA
灰度分析
方法
1
1.
首先打开软件后,开启图档;
2.
请先做校正,
选择
Analyze
底下的
Calibrate
选项,
再选择校正的模式,
使用
Uncalibrate
OD
,再按
ok
;
3.
在
要
分
析
的
第
一
条
(first
lane)
加
上
一
个
长
型
框
(
工
具
列
第
一
个
选
项
)
,
再
按
下
Analyze/Gels/select first Lane
快速键
(Ctr+1)
,
此时框架中会出现一个号码
1
,
之后可以移动框
架到第二个
lane
再选择
Analyze/Gels/select second Lane
快速键
(Ctr+2)
,
当然可以一直加下去,
最后按
Analyze/Gels/plot Lanes
快速键
(Ctr +3)
;
4.
分析以后会出现图型表示你刚选择的框内的影像强度,
此时可以看到有几个比较高的
区段,
就是我们想定量的
band
,
使用直线工具
(
工具列第五个选项
)
先将图形中高点为有
band
的区域和没有
band
的区域分开再,
使用魔术棒工具
(
工具列第八个选项
)
点选要分析的区域;
5.
当我们点选分析时,在
result
的对话视窗会出现分析的数据,依序点选就会出现每
个
band
的值。
方法
2
1.
打开图
2.
选择要分析的条带,
Ctrl+M
测
WB
灰度分析
1.
打开文件;
2.
把图片转化成灰度图片:
Image>Type
选
8-bit
;
3.
消除背景影响:
Process>Subtract Background.
选择
50
基本可以。
4.
设置定量参数:
Analyze>Set
Measurements,
点击面积,平均密度,和灰度值及
Integrated Density
;
5.
设置单位
Analyze>Set Scale,
在“
Unit of length
”
边的方框里输入
"pixels"
;
6.
把图片转换成亮带,
Edit>Invert
;
7.
选择
Freehand Selection
;尽量把条带圈起来;
点击键盘
m
,出来
IntDen
灰度值;
8.
用“
Freehand Selection
”选择下一条带,按
m
进行测量。
11.
当测定完所有条带,选结果中的“
Edit
”的“
Select
All
”
,然后复制数据“
IntDen
”
到
Excel
表即可进行分析。
Merge
1.
打开文件;
2. Image
–
color
–
merge channels
;
3.
同样的要把输出的彩色图像名字为
composite
类型变为
RGB color Iamge
--
type
--
RGB
color
;
4.
然后
ctrl+S
保存就可以了。